Programma del Corso e delle esercitazioni (Testo suggerito- Modalità di verifica dell'apprendimento)

PROGRAMMA: 1) Il genoma umano - Cenni di citologia: organizzazione del DNA all’interno della cellula; cromosomi e cariotipo - Struttura del DNA, geni e DNA non codificante - origine della diversità genetica: mitosi e meiosi, ricombinazione - Regioni del genoma non ricombinanti: cromosoma Y e DNA mitocondriale - la variabilità del genoma umano: mutazioni e polimorfismi - i polimorfismi del DNA in genetica forense, i profili genetici e i sistemi usati dal CODIS (1 esercitazione: identificazione del gruppo sanguigno ABO e Rh) - i polimorfismi del cromosoma Y e del DNA mitocondriale - l’importanza dei database del DNA genetici a uso forense: nucleotidiche, aplotipiche e di profili genetici (1 esercitazione: consultazione banche dati DNA) 2) Dalla teoria alla pratica - ricerca delle tracce biologiche (sangue, saliva, ecc.) tecniche e tecnologie del sopralluogo I test per l’identificazione personale (emogenetica classica, diagnosi generica di specie, fonti ordinarie del DNA) (1 esercitazione: Identificazione di una traccia ematica con il metodo presuntivo con il test di Kastle-Meyer) 3) Estrazione, analisi qualitativa e quantitativa del DNA e quantizzazione del DNA estratto (2 esercitazioni: estrazione del DNA con differenti tecniche (chelex, fenolo-cloroformio, colonne silice, salting-out) e da diversi substrati come saliva, tracce ematiche, sigaretta, ecc.). (1 Esercitazione: quantificazione del DNA estratto (fluorimetro, nanodrop) 4) Tecniche per l’analisi dei polimorfismi - la reazione a catena della polimerasi (PCR) (1 esercitazione: amplificazione con PCR di un minisatellite) (1 esercitazione: preparazione gel di agarosio e poliacrilammide) -il sequenziamento del DNA e problemi interpretativi dei prodotti di sequenziamento e minisequenziamento -la real time PCR - tipizzazione degli SNPs 5) Analisi dei risultati: assegnazione allelica e determinazione del genotipo; Software utilizzati nella pratica forense Interpretazione degli elettroferogrammi e problemi interpretativi nella tipizzazione dei microsatelliti 6) Statistica applicata all'esame dei polimorfismi del DNA: Le leggi di Mendel; La legge di Hardy-Weinberg (con esercizi) -La probabilità e calcolo delle probabilità nelle indagini di identificazione individuale; calcolo biostatistico nelle indagini di paternità – cenni della problematiche giuridiche e deontologiche; dati genetici e privacy. ---LIBRO DI TESTO SUGGERITO: Introduzione alla genetica forense: Indagini di identificazione personale e di paternità. Adriano Tagliabracci- Springer -Editore - --VERIFICA DELL'APPRENDIMENTO: prova scritta volta, ma anche l’attività di laboratorio verrà valutata in base all’impegno durante lo svolgimento del laboratorio stesso. L’esito dell’esame sarà in trentesimi: la prova si ritiene superata con una votazione di almeno 18/30 della prova scritta.